Научные отчеты

КЛИНИЧЕСКИЕ  ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведено множество клинических испытаний SILIPHOS® для изучения эффекта его применения при различных нарушениях функций печени. 

В испытании, проведенном в научно-исследовательских лабораториях Inverni della Beffa, (Милан, Италия), определялся уровень силибина в плазме крови и в желчи у крыс, после единственной эквимолярной пероральной дозы (200 мг/кг в пересчете на силибин) комплекса силибина и фосфатидилхолина - SILIPHOS® (лабораторный код IdB 1016) и силимарина. Уровень силибина был проанализирован, используя специфический метод (HPLC method), позволяющий также определить наличие других флавонолигнанов, присутствующих в биологических жидкостях после применения силимарина (силидианин, силихристин и изосилибин). 

После перорального приема SILIPHOS®, максимальный уровень силибина в плазме был достигнут в течение 2 часов, и составил 9.0 +/- 3.0 мкг/мл неконъюгированного препарата и 93.4 +/- 16.7 мкг/мл в общем (свободный + неконьюгированный препарат). Максимальная общая концентрация силибина в желчи (2989 +/- 568 мкг/мл) наблюдалась по прошествии 2 часов, после 24 часов выведение с желчью составило около 13% от полученной дозы. 

После назначения силимарина, уровень неконьюгированного и общего силибина в плазме крови, а также в желчи были в несколько раз ниже, чем после назначения SILIPHOS®. Уровень силибина через 24 часа после применения силимарина, составил 2% от полученной дозы. В плазме и желчи после применения силимарина, содержались также силидианин, силихристин, и (в большем количестве) изосилибин. Концентрация этих компонентов в плазме и желчи была выше, чем концентрация силибина. 

В результате эксперимента установлено, что относительная биоусвояемость SILIPHOS® в 10 раз превышает биоусвояемость силимарина. (1)

Силибин является главным активным веществом силимарина – стандартизованного экстракта семян расторопши (Silybum marianum Gaertn.). SILIPHOS® - комплекс силибина и фосфатидилхолина из сои, который защищает печень от повреждений, вызванных токсическими веществами, такими как алкоголь и фаллоидин. Исследования показали, что SILIPHOS® не накапливается в организме больных циррозом печени после многократного использования. 

Данные свидетельствуют о том, что SILIPHOS® является безопасным средством и может использоваться в долговременном лечении пациентов, страдающих циррозом печени. (2)

Целью исследования итальянских ученых было определение эффективности SILIPHOS® при повреждениях печени, вызванных различными агентами.

В результате исследования установлен значительный и зависящий от дозы приема защитный эффект SILIPHOS® против повреждений печени, вызванных токсическими веществами различного происхождения. Одно из таких веществ – галактосомин, по воздействию имитирующее гепатит. Была установлена эффективность перорального приема SILIPHOS® и малоэффективность силибина, не связанного в комплекс. 

Следовательно – только связанный в комплекс силибин достигает необходимой концентрации в очаге действия. Результаты исследования указывают на то, что SILIPHOS® является многообещающим терапевтическим средством при лечении гепатита. (3)

Учеными кафедры медицины внутренних органов Университета г. Павиа (Италия) и Медицинской кафедры Inverni Della Beffa S.p.A (г. Милан) проведено исследование с целью определения оптимальной дозы SILIPHOS® для больных хроническим гепатитом вирусного или алкогольного происхождения.

Исследование показало, что применение SILIPHOS® дает положительные результаты для больных гепатитом вирусного или алкогольного происхождения при пероральном приеме по 160 мг в день. Значительные улучшения были получены при дозе 240 мг в день. Еще более эффективной была доза 360 мг в день. 

Все эти дозы измерялись в пересчете на силибин, который составляет 33% SILIPHOS® (67% составляет фосфатидилхолин). Поэтому при расчете соответствующей дозы силибина, количество SILIPHOS® нужно умножить на 3.

Самая низкая доза (160 мг) оказывала некоторое положительное воздействие, но исследование продемонстрировало клинические и статистические доказательства минимальной рекомендуемой дозы 240 мг в день (в пересчете на силибин). Поскольку не выявлено никаких свидетельств повышенного риска побочных эффектов при дозе 360 мг в день, предполагается, что эта доза более эффективна по многим параметрам, чем 240 мг. Применение повышенной дозы может быть целесообразным для пациентов, нуждающихся в срочном или более мощном фармакодинамическом воздействии SILIPHOS®. (4)

Дополнительное исследование было проведено итальянскими учеными Медицинской кафедры Inverni Della Beffa S.p.A (г. Милан) для определения эффективности SILIPHOS® при различных проблемах печени. 

В предыдущем исследовании была подтверждена прекрасная переносимость SILIPHOS® при дозах 360 мг (в пересчете на силибин) 3 раза в день в течение 3 недель. Настоящее исследование являлось частью всесторонней программы изучения эффективности SILIPHOS® при различных заболеваниях печени. 

Данные базируются на эксперименте, в котором принимало участие 232 пациента, страдающих заболеваниями печени (в том числе алкогольным или острым вирусным гепатитом), которые принимали SILIPHOS® в капсулах, по 120 мг 2-3 раза в день в течение 120 дней. В контрольной группе 49 человек принимали стандартизованный экстракт расторопши (70% силибина) и 117 человек получали плацебо. Результаты оценивались по биохимическим маркерам. 

Результаты исследования подтвердили эффективность силибина в восстановлении функций печени при состояниях, связанных с токсическим или инфекционным повреждением печени. 

Биоусвояемость SILIPHOS® была выше, его клиническое применение – более эффективным, по сравнению со стандартизованным экстрактом силибина. (5)

Для того чтобы проанализировать защитный эффект, оказываемый на печень комплексом силибина и фосфатидилхолина (SILIPHOS®), а также его антиоксидантные свойства, итальянскими учеными было проведено короткое предварительное исследование, в котором участвовали 20 больных, страдающих активным хроническим гепатитом. Пациентам было выборочно назначено 240 мг силибина 2 раза в день (10 пациентов: четверо мужчин, шесть женщин, средний возраст 50 лет) или плацебо (10 пациентов: двое мужчин, восемь женщин, средний возраст 55 лет). До исследования, и через 7 дней после начала лечения, были взяты анализы крови: тест функции печени (LFTs); уровень малональдегида (MDA), как индекс окисления липидов; анализ, определяющий количество меди (Cu) и цинка (Zn) – двух микроэлементов, вовлеченных в защиту клеток от окисления липидов, вызванного свободными радикалами. 

В группе, принимавшей комплекс силибина и фосфатидилхолина, замечено значительное статистическое снижение средней (+/- SEM) концентрации в сыворотке аспартат-аминотрансферазы (AST) с 88.0 (+/- 13.3) до 65.9 (+/- 7.5) u/l, (p < 0.01), аланин-аминотрансферазы (ALT) с 115.9 (+/- 12.9) до 82.5 (+/- 10.6) u/l (p < 0.01), гамма-глютамилтранспептидазы (gamma-GT) с 51.4 (+/- 9.3) до 41.3 (+/- 4.2) u/l (p < 0.02) и общего билирубина (TB) с 0.76 (+/- 0.08) до 0.53 (+/- 0.04) мг/лд (p < 0.05). Уровень щелочной фосфатазы снизился с 143.4 (+/- 6.4) до 137.5 (+/- 7.8) u/l. 

Результаты исследования показали, что биохимические параметры, связанные с гепатоцеллюлярными повреждениями и некрозом у пациентов, страдающих активным хроническим гепатитом, значительно снизились после 7 дней применения SILIPHOS® (рис. 9). (6)

Рис. 9

В клиническом исследовании, проведенном в Италии, 8 пациентов (двое мужчин и шесть женщин), страдающих активным хроническим гепатитом, принимали SILIPHOS® в течение 2 месяцев. После лечения уровень малондиальдегидов в сыворотке крови снизился на 36% (что означает значительное снижение повреждения печени) и количественная оценка функции печени улучшилась на 15% (очень впечатляющий результат). Было обнаружено также статистически значимое снижение уровня трансаминаз. Эти результаты продемонстрировали, что SILIPHOS® эффективен в улучшении биохимических и количественных индексов функции печени у больных, страдающих активным хроническим гепатитом. (7)

Целью исследования ученых кафедры медицинской фармакологии Университета Павиа (Италия) являлось изучение биоусвояемости силибина, которая значительно повышается при приеме его в форме комплекса с фосфатидилхолином (SILIPHOS®). Кроме того, ученые искали ответ на вопрос: меняются ли фармакокинетические свойства SILIPHOS® при многократном использовании.

В исследовании принимали участие здоровые волонтеры, и было установлено, что эффективность препарата не уменьшается при длительном использовании. 

9 здоровым волонтерам были назначены единовременные оральные дозы SILIPHOS® и силимарина (эквивалентные 360 мг силибина). Хотя всасывание происходило быстро в обоих случаях, биоусвояемость SILIPHOS® значительно превышала биоусвояемость силимарина, о чем свидетельствовал более высокий уровень силибина в плазме на протяжении всего теста. Независимо от используемого препарата, окончательный период полувыведения был относительно коротким (меньше 4 часов). 

В последующем испытании 9 здоровых волонтеров получали SILIPHOS® (120 мг 2 раза в день в пересчете на силибин) в течение 8 последовательных дней. Уровень силибина в плазме и кинетические параметры в первый, и восьмой день были аналогичными. Большая часть силибина в системе кровообращении была в конъюгированной форме. (8)

Учеными кафедры Экспериментальной медицины и онкологии Туринского Университета и Центра иммуногенетики и экспериментальной онкологии (г. Турин, Италия) установлено, что SILIPHOS® обладает более высокой биоусвояемостью, чем флавоноид силибин и оказывает антиоксидантное воздействие на микросомы печени. 

SILIPHOS® в концентрации, которая полностью предотвращала образование малонового диальдегида (MDA), также защищал изолированные гепатоциты от токсических веществ. Подобный защитный эффект оказывался также на гепатоциты «in vivo», в то время как прием силибина в чистом виде оказался малоэффективным (эксперимент на крысах). 

Результаты эксперимента показывают, что SILIPHOS® оказывает защитное действие при токсическом повреждении печени, вызванном свободными радикалами.

Более того, впервые было установлено, что SILIPHOS® способен противостоять гепатотоксическому воздействию различных соединений, вызывающих оксидативные процессы. Тем самым, SILIPHOS® может с успехом применяться в качестве гепатопротектора. (9)

Результаты исследования, проведенного итальянскими учеными кафедры экспериментальной медицины и онкологии Туринского Университета, Центра иммуногенетики и экспериментальной онкологии (г. Турин) и института общей патологии Университета г. Модена (Италия), показали, что SILIPHOS® эффективно подавляет алкоголь-производные свободные радикалы – гидроксиэтил. Этот эффект не наблюдается при приеме силибина в чистом виде. Способность SILIPHOS® подавлять активность этанол-производных свободных радикалов, наряду с антиоксидантной активностью, позволяет использовать SILIPHOS® при повреждении печени, вызванном злоупотреблением алкоголя. (10)

(Также на кафедре Экспериментальной медицины и онкологии Университета г. Турина (Италия) изучались антиоксидантные свойства SILIPHOS®. 

Флавоноиды – обширная группа веществ растительного происхождения, обладающих антигепатотоксическим действием. Экстракт расторопши (Silybum marianum) – силимарин, вызывает особый интерес, благодаря своим антиоксидантным свойствам. Однако возможность применение флавоноидов ограничивается их плохой водорастворимостью и низкой биоусвояемостью. Для повышения биоусвояемости был создан комплекс силибина и фосфатидилхолина - SILIPHOS®. 

Исследование показало, что после перорального приема SILIPHOS®, уровень его в плазме крови подопытных крыс был значительно выше, чем после приема не связанного в комплекс силибина или силимарина. 

Было установлено, что SILIPHOS® способен проникать в клетки в такой концентрации, которая делает его эффективным в качестве антиоксиданта. К тому же, доказано что SILIPHOS® преимущественно воздействует именно на печень.

Таким образом, благодаря способности бороться со свободными радикалами, этот препарат способен защищать печень от разрушений, вызванных свободными радикалами. (11)

Данные исследования свидетельствуют о том, что биоусвояемость силибина гораздо выше при приеме SILIPHOS®, по сравнению с силимарином. В результате этого в орган-мишень - печень поступает большее количество препарата.

Выведение с желчью силибина, главного активного компонента силимарина, было проанализировано с использованием специфического метода (HPLC method) у 9 больных, перенесших холецистэктомию, после приема пероральной дозы SILIPHOS® и силимарина (120 мг в пересчете на силибин).

После приема SILIPHOS®, концентрация силибина в желчи достигла пика через 4 часа и стала снижаться после этого в среднем на протяжении 10 часов. После приема силимарина, концентрация силибина в желчи была в несколько раз ниже, чем та, что наблюдалась во время приема SILIPHOS®.

После приема силимарина, в желчи также содержалось значительное количество изосилибина (изомера силибина) и очень низкие уровни силидианина и силихристина. Количество силибина в желчи в свободной и коньюгированной форме в течение 48 часов составляло 11% от полученной дозы после приема SILIPHOS® и 3% от дозы после приема силимарина. Концентрация силибина в плазме у троих пациентов была в несколько раз ниже, чем в желчи после приема SILIPHOS® и практически не поддавалась определению после приема силимарина. (12)

C 1980 по 1981 год было изучено 18 случаев применения силибина при отравлении бледными поганками (Amanita phalloides). В соответствие с клиническими и лабораторными показаниями, все случаи были разделены на 3 категории – легкие, средней тяжести и тяжелые. Была обнаружена связь между эффективностью лечения и временем назначения препарата – чем раньше начато лечение силибином, тем оно эффективнее. В особо тяжелых случаях силибин был назначен в среднем через 71.5 час после отравления, в группе средней тяжести – через 46 и группе легкого отравления – через 33.8 часа. Средняя продолжительность лечения силибином составила 81.6 часа. За исключением одного случая намеренного самоубийства, все пациенты выжили.

Результат исследования показал, что применение силибина в течение 48 часов после отравления бледными поганками способно предотвратить тяжелое поражение печени. (13) 

Литература

1. Morazzoni P., Montalbetti A., Malandrino S., Pifferi G., Comparative pharmacokinetics of silipide and silymarin in rats. Eur. J. Drug Metabol. Pharmacokinet. 18, 289 (1993).

2. Orlando R, Fragasso A, Lampertico M, Marena C. Silybin kinetics in patients with liver cirrhosis: a comparative study of a silybin-phosphatidylcholine complex and silymarin. Metab Sci Res. 1990; 18:861–863. Med. Sci. Res. 19, 827 (1991).

3. Conti M., Malandrino S., Magistretti M.J., Protective activity of silipide on liver damage in rodents. Jpn J. Pharmacol. 1992 Dec;60(4):315-21.

4. Vailati A., Aristia L., Sozzè E., Milani., Inglese V., Galenda P., Bossolo P.A., Ascari E., Lampertico M., Comis S., Marena G., Randomized open study of the dose-effect relationship of a short course of IdB 1016 (Siliphos®) in patients with viral or alcoholic hepatitis. Fitoterapia 64, 219 (1993).

5. Marena C., Lampertico M., Preliminary Clinical Development of Silipide (Siliphos®), A New Complex of Silybin, in Toxic Liver Disorders. Planta Med. 57, suppl., A124 (1991).

6. Buzzelli G., Moscarella S., Giusti A., Duchini A., Marena C., Lampertico M., Int. J. Clin. Pharmacol. Ther. Toxicol. 31, 456 (1993).

7. Moscarella S., Giusti A., Marra F., Marena C., Lampertico M., Relli P., Gentilini P., Buzzelli G., Curr. Ther.Res. 53, 98 (1993) 

8. Barzaghi N., Perucca E., Pifferi G., Crema A., Flavonoids in Biology and Medicine, Singapore, November 13-17, 1989.

9. Rita Carini, Adriana Comoglio, Emanuele Albano and Giuseppe Poli. Lipid Peroxidation and Irreversible Damage in the Rat Hepatocyte Model. Biochemical Pharmacology, Vol. 43, No. 10, pp 2111-2115, (1992) 

10. Comoglio, A. Tomasi, S. Malandrino, G. Poli and E. Albano. Scavenging Effect of Silipide (Siliphos®), a new Silybin-phospholipid Complex, on Ethanol-Derived Free Radicals. Biochemical Pharmacology, Vol. 50 No. 8, pp. 1313-1316, 1995 

11. Comoglio A, Leonarduzzi G, Carini R, Busolin D, Basaga H, Albano E, Tomasi A, Poli G, Morazzoni P, Magistretti MJ. Studies on the antioxidant and free radical scavenging properties of IdB 1016 a new flavanolignan complex. Free Rad. Res. Comms., Vol. 11, Nos. 1-3, pp.109-115

12. Schandalik R, Gatti G, Perucca E. Pharmacokinetics of silybin in bile following administration of silipide and silymarin in cholecystectomy patients. Arzneimittelforschung 1992 Jul;42(7):964-8

13. Hruby K, Csomos G, Fuhrmann M, Thaler H. Chemotherapy of Amanita phalloides poisoning with intravenous silibinin. Hum Toxicol. 1983 Apr;2(2):183-95.